Наборы FRET для генотипирования

Предназначены для генотипирования выборок при количестве образцов от 1 до 100-1000.

Наборы, основанные на применении зондов с резонансным переносом энергии, отличаются повышенной специфичностью, так как изменение флуоресценции происходит при комплементарном связывании с ампликонами сразу двух ДНК-зондов. После проведения амплификации производится построение "кривых плавления", но не ПЦР-продуктов, а дуплексов зондов с ампликоном, что позволяет с высокой достоверностью автоматически определять генотип образца с помощью програмного обеспечения прибора.

В наших наборах мы используем широко распространенный метод детекции с использованием явления переноса энергии с помощью флуоресцентного резонанса (FRET). Вариант технологии с химическими модификациями LNA (locked nucleic acids) позволяет добиться высоких показателей чувствительности и специфичности тест-системы и преодолеть такой недостаток других подходов как неоднозначность генотипирования при единичных постановках.

Наборы совместимы с детектирующими амплификаторами: ДТ-96, DTprime, DTlite, Roche LightCycler и др.

Состав набора

•Готовая смесь для ПЦР (мастермикс)
•Taq-полимераза
•Деионизированная вода
•Инструкция

Наборы рассчитаны на 300 определений для одного локуса и включают все реагенты, достаточные для генотипирования паспортного количества образцов ДНК в 20 мкл реакционной смеси по одному локусу (SNP).

Принцип действия

В реакционную смесь введены три ДНК-зонда (к двум аллелям исследуемого полиморфизма и зонд с гасителем флуоресценции). После проведения проведения амплификации проводится построение "кривых плавления" образовавшихся дуплексов "зонд-ампликон", в процессе которого происходит перенос энергии с аллель-специфичных зондов на зонд с гасителем флуоресценции, что позволяет детектировать наличие в амплифицированной смеси того или иного аллеля образца ДНК. Специальные условия амплификации и дизайн зондов позволяют добиться раздельного высокоспецифичного определения двух аллелей в одной реакционной пробирке.